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ELISA试剂盒检测原理
Wed May 26 00:00:00 CST 2021昀冠科学商城新闻编辑
ELISA试剂盒检测原理
免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,所以任何优质的诊断试剂离不开优质的原料,如抗原抗体,酶等。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。
随着分子生物学的发展,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等免疫测定试剂几成为现实的新一代试剂,各种新型使用的测定方法也不断出现。
ELISA生物检测方法具有敏感度高，特异性强，重复性好等优点。ELISA生物检测试剂稳定、易保存，操作简便，结果判断较客观等因素，已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
ELISA的基本原理有三条：
（1）抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫学活性；
（2）抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性；
（3）酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。
目前市面上的ELISA试剂盒检测原理主要有以下四种：直接法，间接法，夹心法，竞争法。
ELISA试剂盒评价标准：
① 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，应大于等于0.9900。
② 灵敏度：反应试剂盒的最低检测浓度
③ 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
④ 重复性：板内、板间变异系数
⑤ 回收率：判断实验的准确性和特异性
ELISA试剂盒液体类标本:包含血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培育上清等。昀冠科学商城友情提醒：ELISA试剂盒在搜集样本前需要有一个完好的方案，确定检测的成份是否稳定。
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